| 正交实验法优化洋金花总生物碱的提取工艺研究 | |
| 发布日期:[08-04-03 00:37:32] 点击次数:[]
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洋金花为茄科植物白曼陀罗(datura metel L)的干燥花,又称为南洋金花。而同科同属植物毛曼陀罗(datura innoxia mill)的干燥花称北洋金花。前者主产于江苏、福建、广东等地。洋金花具有平喘止咳、镇痛、解痉的功效[1]。洋金花中含生物碱0.3%~0.43%,其中东莨菪碱约占85%,莨菪碱和阿托品共占约15%。游离生物碱类及其盐一般都能溶于乙醇,故选用乙醇作为溶剂[2]。有效利用洋金花药材资源,控制中药制剂质量,本实验以溶剂浓度A、溶剂倍量B、提取次数C、pH值D为考察因素,每因素设置3个水平,以总生物碱浸膏和总生物碱含量为定量指标,采用正交设计优选酸性乙醇提取条件,为制订科学、经济的洋金花总生物碱制备工艺提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 材料 洋金花(产地湖北,生产批号05100101,调出单位北京普生霖药业有限公司)。乙醇、石油醚、氨水、氯仿、硫酸滴定液(0.01 mol/L)、甲基红试液、氢氧化钠(0.02 mol/L)溶液、烘箱、滴定管(定制)。 1.2 实验方法 1.2.1 提取条件的选择 为了优化提取工艺,根据药材提取过程中的影响因素,考虑乙醇浓度、溶剂倍量、提取次数及pH值4个因素,选择L9(3)4正交表实施实验,见表1 表1 实验因素和水平把洋金花粉碎过40目筛,称取洋金花粉末10 g,共9份,按照正交设计方案,进行L9(3)4正交实验,提取液放置过夜,过滤,合并滤液,回收乙醇,浓缩至干,得浸膏。 www.hnxxlw.cn 1.2.2 总生物碱的纯化 将上述醇浸膏各加水40 ml,加热溶解后并调pH为2~3,过滤,用5 ml的石油醚脱脂2次,用氨试液调pH值至10,依次用40 ml、30 ml、30 ml的氯仿萃取3次,回收氯仿得总生物碱浸膏,在烘箱干燥1天,在干燥器冷却15 min,称重[1]。结果见表2。表2 L9(3)4正交试验表及试验结果 1.2.3 总生物碱的含量测定 (1)样品液的制备:将上面样品的总生物碱浸膏分别用95%乙醇溶解至相当于每1 ml含0.4 g洋金花,摇匀后精密吸取20 ml,水浴蒸干,残留物加中性乙醇5 ml。(2)总生物碱的测定[2]:在上述(1)的样品液精密加入硫酸滴定液(0.01 mol/L)10 ml,水10 ml与甲基红试液6滴,用氢氧化钠(0.02 mol/L)溶液滴定黄色,以无水乙醇按同样的方法处理作空白,按下式计总生物碱的含量,结果见表2中总生物碱含量。 X%=C(V0-V1)×303×100%/10 C:氢氧化钠滴定液摩尔浓度 VO:空白消耗氢氧化钠滴定液毫升数 V1:供试品消耗氢氧化钠滴定液毫升数 303:东莨菪碱的分子量 2 实验结果及分析 根据以上的实验结果,有2个指标即总生物碱浸膏重和总生物碱含量,两个指标对洋金花提取工艺评价都很重要,总生物碱得率最高的得50以及总生物碱含量最高的得分也为50,求出总得分见表2。 总得分=总生物碱浸膏重/0.572×50+总生物碱含量/0.318×50最后按照总得分进行实验直观分析和方差分析,分析结果见表3。 表3 方差分析结果 注:**:溶剂浓度A因素有显著性 正交设计结果分析:将实验得到的数据用直观分析法和方差分析法进行统计学处理,可以看出,影响总生物碱浸膏得率的因素顺序为A>B>D>C,A因素中A2>A3>A1,B因素中B2>B3>B1,C因素中C3>C2>C1,D因素中D2>D1>D3,所以最佳提取工艺为A2B2C3D2,用80%的酸水乙醇,酸水pH值为3,用4倍量的溶剂,提取3次。 为了验 |
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